人胱天蛋白酶12进口ELISA试剂盒报价
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包被的方式 将抗原或抗体固定在过程称为包被(coating).换言之，包被即是抗原或抗体结合到固相载体表面的过程.蛋白质与聚苯乙烯固相载体是通过物理吸附结合的，靠的是蛋白质分子结构上的疏水基团与固相载体表面的疏水基团间的作用力.这种物理吸附是非特异性的，受蛋白质的分子量、等电点、浓度等的影响.载体对不同蛋白质的吸附能力是不相同的，大分子蛋白质较小分子蛋白质通常含有更多的疏水基团，故更易吸附到固相载体表面. 包被用抗体 包被固相载体的抗体应具有高亲和力和高特异性，可取材于抗血清或含单克隆抗体的腹水或培养液.如免疫用抗原中含有杂质（即便是极微量的），在抗血清中将出现杂抗体，必须除去（可用吸收法）后才能用于ELISA，以保证试验的特异性.抗血清不能直接用于包被，应先提取IgG，通常采用硫酸铵盐析和Sephadex凝胶过滤法.一般经硫酸铵盐析粗提的IgG已可用于包被，高度纯化的IgG性质不稳定.如需用高亲和力的抗体包被以提高试验的敏感性，则可采用亲和层析法以除去抗血清中含量较多的非特异性IgG.腹水中单抗的浓度较高，特异性亦较强，因此不需要作吸收和亲和层析处理，一般可将腹水作适当稀释后直接包被，必要时也可用纯化的IgG.应用单抗包被时应注意，一种单抗仅针对一种抗原决定簇，在某些情况下，用多种单抗混合包被，可取得更好的效果.人胱天蛋白酶12进口ELISA试剂盒报价欢迎致电北京方程生物获取相关资料。
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人胱天蛋白酶12进口ELISA试剂盒报价标本因素对ELISA测定的影响,血清是**常用的ELISA标本，血浆一般可视为与血清同等的标本，标本引起的假阳性和假阴性结果主要是干扰性物质所致，分为内源 性物质和外源性物质两种： 1． 内源性物质 有人认为大约40%的人血清标本中含有非特异性干扰物质，可以不同程度影响检测结果.常见的干扰物质有：类风湿因子、补体、嗜异 性抗体、嗜靶抗原自身抗体、医源性诱导的抗鼠Ig (s)抗体、交叉反应物质和其它物质等. （1）类风湿因子 人血清中IgM、IgG型类风湿因子（RF）可以与ELISA系统中的捕获抗体及酶标记二抗的FC段直接结合，从而导致假阳性. 解决该情况的办法是：①用F(ab)2替代完整的IgG；②标本用联有热变性（63℃，10 min）IgG的固相吸附剂处理（将热变性IgG加入到标本稀释液中同样有效）；③检测抗原时，可以用2-巯基乙醇等加入到标本 稀释液中，使RF降解..
白板现象 在完成所有实验步骤进行底物TMB溶液显色后，酶标板中所有孔的颜色均为无色，即无信号呈现. 出现该现象的可能原因： 试剂已过保质期，不同批次稀释液交叉使用. 错加漏加检测A，检测B或者底物溶液TMB. 洗板或者加样过程中，酶标记物被污染失活，稀释液中含有酶抑制剂如叠氮呐等. 配置稀释液的蒸馏水可能被污染. 洗涤液是浓缩型的，没有按比例进行稀释. 酶标记物的活性和效价比较低. 溶液的PH值不正确，一般稀释液的PH值应保持在7.2-7.4..
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根据试剂的来源和标本的性状及检测的具备条件，可设计出各种不同类型的检测方法. ELISA，即酶联免疫吸附实验，其基本原理是将一定浓度的抗原或者抗体通过物理吸附的方法固定于聚苯乙烯微孔板表面，加入待检标本，通过酶标物显色的深浅间接反映被检抗原或者抗体的存在与否或者量的多少.ELISA技术作为免疫标记技术（包含免疫荧光技术，免疫放射技术，免疫酶技术和免疫胶体金技术）中的一种，已广泛应用于科研和临床实验中，具有**，定性或者定量甚至定位的特点.. 双抗体夹心法，其基本原理是将一定量的包被抗体以物理吸附的方法固定于聚苯乙烯微孔板表面，加入无关蛋白载体封闭未结合位点，然后加入待检标本，通过加入检测抗体，酶标记第二抗体后用TMB底物显色，微孔板中颜色的深浅与待测物的浓度呈正相关. 该方法的适用条件是：含有多个抗原表位的大分子物质.因为这种检测方法需要两种抗体，所以就涉及抗体配对的问题.一般而言，常用的抗体配对方法有一下几种：包被抗体为单抗，检测抗体为多抗；包被抗体为单抗，检测抗体为单抗，但这两种单抗针对的抗原表位不同；包被抗体为多抗，检测抗体为多抗，这两种多抗一般是来源于不同的宿主.
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