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洗涤的方式除某些ELISA仪器配有特殊的自动洗涤仪外，手工操作有浸泡式和流水冲洗式两种，过程如下： （1）浸泡式 a.吸干或甩干孔内反应液；b.用洗涤液过洗一遍（将洗涤液注满板孔后，即甩去）；c.浸泡，即将洗涤液注满板孔，放置1-2分钟，间歇摇动，浸泡时间不可随意缩短；d.吸干孔内液体.吸干应**，可用水泵或真空泵抽吸，也可甩去液体后在清洁毛巾或吸水纸上拍干；e.重复操作c和d，洗涤3-4次（或按说明规定）.在间接法中如本底较高，可增加洗涤次数或延长浸泡时间. 微量滴定板多采用浸泡式洗涤法.洗涤液多为含非离子型洗涤剂的中性缓冲液.聚苯乙烯载体与蛋白质的结合是疏水性的，非离子型洗涤剂既含疏水基团，也含亲水基团，其疏水基团与蛋白质的疏水基团借疏水键结合，从而削弱蛋白质与固相载体的结合，并借助于亲水基团和水分子的结合作用，使蛋白质回复到水溶液状态，从而脱离固相载体.洗涤液中的非离子型洗涤剂一般是吐温20，其浓度可在0.05%-0.2%之间，高于0.2%时，可使包被在固相上的抗原或抗体解吸附而减低试验的灵敏度. （2）流水冲洗式 流水冲洗法**初用于小珠载体的洗涤，洗涤液仅为蒸馏水甚至可用自来水.洗涤时附接一特殊装置，使小珠在流水冲击下不断地滚动淋洗，持续冲洗2分钟后，吸干液体，再用蒸馏水浸泡2分钟，吸干即可.浸泡式犹如盆浴，流水冲洗式则好比淋浴，其洗涤效果更为**，且也简便、**.已有实验表明，流水冲洗式同样也适用于微量滴定板的洗涤.洗涤时设法加大水流量或加大水压，让水流冲击板孔表面，洗涤效果更佳人睫状神经营养因子进口ELISA试剂盒报价欢迎致电北京方程生物获取相关资料。
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人睫状神经营养因子进口ELISA试剂盒报价标本因素对ELISA测定的影响,血清是**常用的ELISA标本，血浆一般可视为与血清同等的标本，标本引起的假阳性和假阴性结果主要是干扰性物质所致，分为内源 性物质和外源性物质两种： 1． 内源性物质 有人认为大约40%的人血清标本中含有非特异性干扰物质，可以不同程度影响检测结果.常见的干扰物质有：类风湿因子、补体、嗜异 性抗体、嗜靶抗原自身抗体、医源性诱导的抗鼠Ig (s)抗体、交叉反应物质和其它物质等. （1）类风湿因子 人血清中IgM、IgG型类风湿因子（RF）可以与ELISA系统中的捕获抗体及酶标记二抗的FC段直接结合，从而导致假阳性. 解决该情况的办法是：①用F(ab)2替代完整的IgG；②标本用联有热变性（63℃，10 min）IgG的固相吸附剂处理（将热变性IgG加入到标本稀释液中同样有效）；③检测抗原时，可以用2-巯基乙醇等加入到标本 稀释液中，使RF降解..
. 在ELISA实验中应注意以下问题： 1.在实验前应该按相关要求将实验试剂平衡至室温. 2.包被抗体和检测抗体应该是有高活性的且都针对同一抗原. 3.试剂保存：蛋白抗体类试剂保存于-20摄氏度，显色液洗涤液保存于2-8摄氏度. 4.各试剂在使用前应充分混匀，以保证试剂的均一性和准确性. 5.严格控制反应温度和反应试剂. 6.洗板次数，洗板液的量，洗板液浸泡时间的长短，洗板的力度都是应该注意的问题. 7.相关浓缩液应按要求稀释到相应比例方可使用，PH值要保持在7.2-7.4之间. 8.在终止反应时尽量避免微孔中存有气泡. 9.终止反应完成后应该在2min内完成酶标仪读数..
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血清标本宜在新鲜时检测.如有细菌污染，菌体中可能含有内源性HRP，也会产生假阳性反应.如在冰箱中保存过久，其中的可发生聚合，在间接法ELISA中可使本底加深.一般说来，在5天内测定的血清标本可放置于4℃，超过一周测定的需低温冰存.冻结血清融解后，蛋白质局部浓缩，分布不均，应充分混匀宜轻缓，避免气泡，可上下颠倒混和，不要在混匀器上强烈振荡.混浊或有沉淀的血清标本应先离心或过滤，澄清后再检测.反复冻融会使抗体效价跌落，所以测抗体的血清标本如需保存作多次检测，宜少量分装冰存.保存血清自采集时就应注意无菌操作，也可加入适当防腐剂.
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